BAL-Zytologie beim Pferd: Neutrophile, Mastzellen und Eosinophile einordnen

Ein zehnjähriger Warmblüter, seit dem Winter etwas weniger leistungsbereit, gelegentlich Husten zu Beginn der Arbeit. Die BAL ergibt 9 Prozent Neutrophile, 3 Prozent Mastzellen und 0,5 Prozent Eosinophile. Ist das ein mild-moderates equines Asthma oder noch ein Graubereich? Für die BAL-Zytologie beim Pferd gelten nach dem ACVIM-Konsensus (Couëtil et al., 2016) Werte bis 5 Prozent Neutrophile, 2 Prozent Mastzellen und 1 Prozent Eosinophile als Referenz. Über 10, 5 und 5 Prozent sprechen klar für ein mild-moderates Asthma, über 25 Prozent Neutrophile für ein schweres Asthma. Dazwischen liegt ein Bereich, in dem Methodik, Probenahme und Klinik die Einordnung bestimmen.

Das Wichtigste in Kürze

• Referenzwerte (Couëtil et al., 2016): Neutrophile ≤ 5 %, Mastzellen ≤ 2 %, Eosinophile ≤ 1 %; konsistent mit mild-moderatem Asthma: > 10 %, > 5 %, > 5 %; schweres Asthma: Neutrophile > 25 %.
• Schnellfärbungen vom Diff-Quik-Typ unterschätzen Mastzellen, weil sie deren Granula nicht anfärben (Leclere et al., 2006).
• Einseitige Lavage führt je nach Population bei 4 bis 25 Prozent der Pferde zu falsch negativen Befunden (Rasmussen et al., 2024).
• Der Mastzell-Differenzialwert ist bei 400-Zellen-Zählung wenig reproduzierbar (Fernandez et al., 2013).

Welche Grenzwerte gelten für die BAL-Zytologie?

Der revidierte Konsensus des American College of Veterinary Internal Medicine (Couëtil et al., 2016) nennt für gesunde Pferde bei einem Instillationsvolumen von 250 ml folgende Referenzwerte: Neutrophile bis 5 Prozent, Eosinophile bis 1 Prozent, metachromatische Zellen (Mastzellen) bis 2 Prozent und eine Gesamtzellzahl bis 530 Zellen/µl. Als vereinbar mit der damals so bezeichneten Inflammatory Airway Disease, heute mild-moderates equines Asthma, gelten mehr als 10 Prozent Neutrophile, mehr als 5 Prozent Mastzellen oder mehr als 5 Prozent Eosinophile. Werte zwischen Referenz und Cut-off werden als nicht eindeutig eingestuft. Für das schwere equine Asthma wird ein Neutrophilenanteil von über 25 Prozent angegeben.

Die Autoren betonen selbst, dass Volumen, Lokalisation, Aliquot, Aufbereitung und Zählmethode feste Grenzwerte erschweren. Im Havemeyer-Review (Couetil et al., 2020) werden die Werte 5/2/1 als „strenge“ Definition bezeichnet. Das erklärt, warum aktuelle Studien unterschiedliche Schwellen verwenden: Rasmussen et al. (2024) und Karagianni et al. (2024) arbeiten mit 5/2/1, Meiseberg et al. (2024) mit 10/5/2 für Neutrophile, Mastzellen und Eosinophile. Ein aktualisierter Konsensus nach 2016 liegt nach unserer Recherche bislang nicht vor.

Ein Scoping Review von Kinnison et al. (2022) über 44 Studien mit insgesamt 6.092 Pferden, davon 72,8 Prozent Rennpferde, kam zu dem Ergebnis, dass der Zusammenhang zwischen BAL-Zytologie und Lungenfunktion inkonsistent ist und knapp die Hälfte der Studien ein hohes Biasrisiko aufwies. Die Grenzwerte sind also gut etabliert, ihre Evidenzbasis aber schmaler, als ihre Verbreitung vermuten lässt.

Neutrophile: Wann ist ein erhöhter Anteil klinisch relevant?

Neutrophile sind der robusteste Parameter der BAL-Zytologie. Fernandez et al. (2013) fanden an Zytospin-Präparaten von 60 Pferden sowohl für die 400-Zellen-Zählung als auch für die 5-Felder-Methode eine hohe Reliabilität (ICC > 0,90).

In der Studie von Meiseberg et al. (2024) an der TiHo Hannover korrelierte der Neutrophilenanteil bei 26 Pferden eng mit dem Schweregrad (ρ = 0,90). Als Trennwert zwischen moderatem und schwerem Asthma ergab die Entscheidungsbaumanalyse 28 Prozent. Ohne BAL-Zytologie ließen sich die Phänotypen klinisch nicht sicher unterscheiden.

Zwei Faktoren sollten bei der Interpretation mitgedacht werden. Erstens Belastung: Lendl et al. (2025) fanden bei 39 Pferden nach einem standardisierten Longiertest in der Gruppe mit mildem Asthma höhere Neutrophilenanteile (Median 21 vs. 4 Prozent), bei moderatem Asthma dagegen niedrigere. Die Gruppen waren klein, der Befund ist hypothesengenerierend. Zweitens eine vorangegangene Lavage: Woodrow et al. (2024) sahen bei sechs gesunden Pferden 48 Stunden nach BAL im Mittel über 10 Prozent Neutrophile, wenn auch statistisch nicht signifikant. Sie halten eine Wiederholung in derselben Lunge ab 72 Stunden für vertretbar.

Mastzellen: Warum Färbung und Zählmethode den Befund verändern

Bei Mastzellen ist die Präanalytik mindestens so wichtig wie der Grenzwert. Leclere et al. (2006) verglichen an Proben von 24 Pferden vier Färbemethoden. Die schnelle Romanowsky-Färbung (Diff-Quik-Typ) lieferte signifikant niedrigere Mastzellanteile, weil sie die Granula nicht anfärbt. May-Grünwald-Giemsa, automatisierte Romanowsky-Färbung und Toluidinblau zeigten die Granula metachromatisch. Toluidinblau ergab die höchsten Werte, eignet sich aber nicht für das komplette Differenzialbild.

Auch die Zellzahl spielt eine Rolle. Nach Fernandez et al. (2013) war die 400-Zellen-Zählung für Mastzellen nicht reliabel, eine ausreichende Reproduzierbarkeit (ICC > 0,85) erreichte nur die 5-Felder-Methode bei Präparaten mit hoher Zelldichte. Im Havemeyer-Review wird empfohlen, mindestens 500 Zellen zu zählen; für seltene Zelltypen wie Mastzellen beschreibt Mazan eine Zählung von 1.000 Zellen.

Klinisch interessant ist der mastozytäre Phänotyp, weil er sich auch molekular abzugrenzen scheint. Karagianni et al. (2024) fanden bei 27 Trabern im mastozytären Profil Hinweise auf Hypersensitivitäts- und Th2-ähnliche Signalwege, im neutrophilen Profil klassische Entzündungswege. In der Hannoveraner Kohorte waren Mastzellen bei allen vier Pferden mit mildem Asthma erhöht (Meiseberg et al., 2024).

Eosinophile: kleiner Anteil, große Streuung

Eosinophile kommen in der BAL gesunder Pferde nur in geringer Zahl vor. Bereits geringe Unterschiede in der Probenahme wirken sich daher relativ stark aus. Rasmussen et al. (2024) fanden bei bilateraler Lavage für Eosinophile nur eine schwache Korrelation zwischen linker und rechter Lunge (ρ = 0,20), für Neutrophile dagegen eine gute (ρ = 0,80). Auch Depecker et al. (2014) beschrieben für Mastzellen und Eosinophile nur eine mäßige Übereinstimmung zwischen beiden Seiten.

Isolierte, gering erhöhte Eosinophilenwerte sollten deshalb immer im Kontext interpretiert werden: Jahreszeit, Haltung, Parasitenstatus und Klinik. Das Havemeyer-Review weist zudem auf Pilzelemente als möglichen Faktor hin. In einer europäischen Studie wurden sie bei 81 Prozent der Sportpferde mit mild-moderatem Asthma nachgewiesen, ein Befund, der noch bestätigt werden muss.

Eine Lunge oder beide: Wie stark beeinflusst die Probenahme das Ergebnis?

Deutlich. Depecker et al. (2014) lavagierten bei 138 Trabern beide Lungen. Neutrophile und Hämosiderophagen lagen rechts höher, und die einseitige Probenahme führte vor allem bei strengen Grenzwerten dazu, dass Pferde fälschlich als gesund eingestuft wurden. Das Havemeyer-Review beziffert die Fehlklassifikation bei einseitiger Lavage auf 8 bis 37 Prozent.

Rasmussen et al. (2024) untersuchten klinisch unauffällige Warmblüter mit bilateraler BAL (59 Pferde im ersten, 70 im zweiten Jahr, May-Grünwald-Giemsa, 500-Zellen-Zählung). 14 bis 16 Prozent der Pferde hatten eine Entzündung nur in einer Lunge. Die linke Lunge allein erreichte die beste diagnostische Genauigkeit (Sensitivität 84 Prozent, AUC 0,92), die gepoolte Probe die schlechteste (Sensitivität 56 Prozent). Mit den strengen Referenzwerten wiesen 91 bis 92 Prozent der Pferde eine Atemwegsentzündung auf, mit den alternativen Grenzwerten 32 bis 36 Prozent. Diese Spanne zeigt, wie stark die Wahl der Cut-offs die Prävalenz bestimmt.

Probe, Zeit, Temperatur: Was passiert zwischen Stall und Labor?

Pickles et al. (2002) zeigten, dass sich Gesamt- und Differenzialzellzahl über 72 Stunden bei 4, 18 und 38 °C nicht diagnostisch relevant veränderten. Die Zellmorphologie verschlechterte sich jedoch nach 48 Stunden bei 4 °C, nach 24 Stunden bei 18 °C und bereits nach 8 Stunden bei 38 °C, Bakterien vermehrten sich ab 24 bzw. 8 Stunden. Fixative verschlechterten die Morphologie zusätzlich. Für die Praxis heißt das: gekühlt transportieren und möglichst innerhalb eines Tages aufarbeiten, besonders im Sommer.

Bedeutung für die Praxis

Aus unserer Sicht lassen sich aus der aktuellen Datenlage einige Punkte ableiten:

• Die Färbemethode für Mastzellen im Befund dokumentieren; bei Schnellfärbungen ist ein grenzwertiger Mastzellbefund nur eingeschränkt verwertbar.
• Bei grenzwertigen Ergebnissen die Zählmethode erfragen: wie viele Zellen, Zytospin oder Ausstrich.
• Bei unklarem Befund eine bilaterale Lavage erwägen, insbesondere bei Mastzellen und Eosinophilen.
• Abstand zu vorangegangener BAL (mindestens 72 Stunden) und Belastung vor der Probenahme berücksichtigen.
• Werte zwischen Referenz und Cut-off nicht isoliert bewerten, sondern mit Anamnese, Klinik, Haltungs- und Fütterungsbedingungen zusammenführen.

Zur Einordnung des Krankheitsbildes verweisen wir auf unseren Beitrag zu Diagnostik und Management des equinen Asthmas 2026 [interner Link – URL bitte ergänzen]. Haltungs- und Raufutterhygiene als Teil des Managements greifen wir in einem der nächsten Beiträge auf [interner Link – bitte ergänzen].

Literatur

1. Couëtil LL, Cardwell JM, Gerber V, Lavoie JP, Léguillette R, Richard EA (2016): Inflammatory airway disease of horses—revised consensus statement. J Vet Intern Med 30(2): 503–515. doi:10.1111/jvim.13824

2. Couetil L, Cardwell JM, Leguillette R, et al. (2020): Equine asthma: current understanding and future directions. Front Vet Sci 7: 450. doi:10.3389/fvets.2020.00450

3. Depecker M, Richard EA, Pitel PH, Fortier G, Leleu C, Couroucé-Malblanc A (2014): Bronchoalveolar lavage fluid in Standardbred racehorses: influence of unilateral/bilateral profiles and cut-off values on lower airway disease diagnosis. Vet J 199(1): 150–156. doi:10.1016/j.tvjl.2013.10.013

4. Fernandez NJ, Hecker KG, Gilroy CV, Warren AL, Léguillette R (2013): Reliability of 400-cell and 5-field leukocyte differential counts for equine bronchoalveolar lavage fluid. Vet Clin Pathol 42(1): 92–98. doi:10.1111/vcp.12013

5. Karagianni AE, Richard EA, Toquet MP, et al. (2024): Distinct molecular profiles underpin mild-to-moderate equine asthma cytological profiles. Cells 13(22): 1926. doi:10.3390/cells13221926

6. Kinnison T, McGilvray TA, Couëtil LL, et al. (2022): Mild-moderate equine asthma: a scoping review of evidence supporting the consensus definition. Vet J 286: 105865. doi:10.1016/j.tvjl.2022.105865

7. Leclere M, Desnoyers M, Beauchamp G, Lavoie JP (2006): Comparison of four staining methods for detection of mast cells in equine bronchoalveolar lavage fluid. J Vet Intern Med 20(2): 377–381. doi:10.1892/0891-6640(2006)20[377:COFSMF]2.0.CO;2

8. Lendl L, Wirth C, Merle R, Barton AK (2025): Influence of a standardized lunging exercise test on BALF cytology in horses suffering from mild–moderate equine asthma. Animals 15(16): 2428. doi:10.3390/ani15162428

9. Meiseberg LK, Delarocque J, de Buhr N, Ohnesorge B (2024): Clinical variability of equine asthma phenotypes and analysis of diagnostic steps in phenotype differentiation. Acta Vet Scand 66: 51. doi:10.1186/s13028-024-00773-7

10. Pickles K, Pirie RS, Rhind S, Dixon PM, McGorum BC (2002): Cytological analysis of equine bronchoalveolar lavage fluid. Part 3: the effect of time, temperature and fixatives. Equine Vet J 34(3): 297–301. doi:10.2746/042516402776185967

11. Rasmussen N, Karlsen P, Otten ND, Fjeldborg J, Hansen S (2024): Bilateral bronchoalveolar lavage cytology profiles in a warmblood horse population during a 1-year period. J Vet Intern Med 38(4): 2391–2398. doi:10.1111/jvim.17118

12. Woodrow JS, Hopster K, Palmisano M, et al. (2024): Time to resolution of airway inflammation caused by bronchoalveolar lavage in healthy horses. J Vet Intern Med 38(5): 2776–2782. doi:10.1111/jvim.17169

Autor:in
Daniela Spliethove
Stand: November 2026. Dieser Beitrag dient der fachlichen Information und stellt keine Therapieempfehlung dar.